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Sicherheitsdatenblatt anzeigen
| Spezifikation | ||||
|---|---|---|---|---|
| Synonym | 2,2'-Dinitro-5,5'-dithiodibenzoesäure, DTNB, Ellman's Reagenz | |||
| Schmelzpunkt | 240 - 244°C | |||
| Formel | C14H8N2O8S2 | |||
| M | 396,36 g/mol | |||
| CAS-Nr.: | 69-78-3 | |||
| HS-Nr.: | 29309099 | |||
| EG-Nr.: | 200-714-4 | |||
| Lagerung: | RT | |||
| LGK: | 10 - 13 | |||
| Entsorgung: | 4 | |||
| WGK: | 1 | |||
| Spezifikation | ||||
| Gehalt (titr.) | min. 99 % | |||
| E 1 %/1 cm (307 nm; 0,001 %; MeOH) | 330 - 370 | |||
| Schwermetalle (als Pb) | max. 0,001 % | |||
| Wasser (K.F.) | max. 0,5 % | |||
| Fe | max. 0,001 % | |||
| Literatur |
|---|
| (1) John, R.A. (1993) Photometric assays in Enzyme Assays: A Practical Approach S. 81 (Eisenthal, R. & Danson, M.F. eds.) Oxford University Press; Oxford, New York, Tokyo. |
| Hinweis |
|---|
|
Wenn eine Enzym-katalysierte Reaktion ein Produkt mit einer reaktiven Gruppe bildet, die nicht im Substrat vorhanden ist, dann kann man ein Reagenz in den Reaktionsansatz zugeben, das direkt mit dem Produkt unter Bildung eines Chromophors reagiert. Dieser Chromophor darf die Enzymreaktion nicht stören. 5,5'-Dithio-bis(2-nitrobenzoesäure) (DTNB, Ellmans-Reagenz) reagiert mit freien Thiolen in einer Austauschreaktion und bildet die gelbe Komponente 4-Nitrothiolat. Zum Nachweis der Acetylcholinesterase (E.C. 3.1.1.7) dient Acetylthiocholiniodid (siehe Bestell-Nr. A3754) als synthetisches Substrat und ersetzt das natürliche Substrat Acetylcholin. Das Enzym spaltet das Substrat Acetylthiocholiniodid unter Bildung von Acetat und dem Thioester Thiocholin. Die freie Thiol-Gruppe des Thiocholins reagiert mit DTNB im Reaktionsansatz. Die Bildung des Reaktionsproduktes 4-Nitrothiolat wird bei 412 nm gemessen. Dieser Nachweis kann bei 30°C in 0,1 M Natriumphosphat-Puffer mit 10 mM DTNB und 12,5 mM Acetylthiocholiniodid durchgeführt werden (1). Stabilität: Lösungen von DTNB sind nicht sehr stabil. Sie können 3-4 Tage bei 2-8°C gelagert werden. Einfrieren verlängert die Haltbarkeit. Es wird empfohlen die Lösungen frisch anzusetzen. |
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