Sicherheitsdatenblatt anzeigen
| Spezifikation | ||||
|---|---|---|---|---|
| Synonym | 2,7-Diamino-10-ethyl-9-phenylphenanthridiumbromid, Homidiumbromid | |||
| Löslichkeit (25°C) | 40 g/L (H2O) | |||
| Schmelzpunkt | 248 - 252°C | |||
| Formel | C21H20BrN3 | |||
| M | 394,33 g/mol | |||
| CAS-Nr. | 1239-45-8 | |||
| HS-Nr. | 29339980 | |||
| EG-Nr. | 214-984-6 | |||
| Lagerung | RT | |||
| LGK | 6.1 A | |||
| Entsorgung | 9 | |||
| R | 22-26-36/37/38-68 | |||
| S | 26-28.2-36/37-45 | |||
 |
sehr giftig, reizend | |||
| Klasse / PG | 6.1/I | |||
| UN-Nr. | UN2811 | |||
| WGK | 3* | |||
| Spezifikation | ||||
| Gehalt (titr.) | min. 98 % | |||
| λmax. (MeOH) | 524 - 527 nm | |||
| E 1 %/1 cm, λmax. | 150 - 160 | |||
| Löslichkeit (1 %; H2O) | klar, rot | |||
| Trocknungsverlust | max. 5,0 % | |||
| NH4Br | max. 0,1 % | |||
| Literatur |
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(1) Waring, M. (1975) in Antibiotics Vol. III , 141-165 (J.W. Corcoran & F.E. Hahn eds.) Springer - Verlag: Übersichtsartikel über Ethidium und Propidium. (2) Lunn, G. & Sansone, E.B. (1987) Anal. Biochem. 162, 453-458 Ethidiumbromid: Zerstörung und Dekontamination von Lösungen. (3) Sambrook, J., Fritsch, E.F. & Maniatis, T. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York. (4) Gärtner, U. et al. (1996) Anal. Biochem. 243, 194-196 Artefakte beim 'Vorfärben' von verdauter, genomischer DNA mit Ethidiumbromid. (5) Lucey, M.J. et al. (1997) BioTechniques 23, 780-782 Reduzierung der Ethidiumbromid-Menge in der Agarose-Gelelektrophorese. (6) Bonasera, V. et al. (2007) BioTechniques 43, 173-176 Protokoll für hoch-sensitive spektrofluorimetrische DNA-Quantifizierung mit EtBr. |
| Hinweis |
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Ethidiumbromid wird zur Färbung von DNA in der Polyacrylamid- oder Agarosegelelektrophorese verwendet. Anregung mit Licht der Wellenlänge 254 nm wird von der DNA aufgenommen und an Ethidiumbromid weitergeleitet. Bei einer Anregung im Bereich 366 nm wird der Farbstoff direkt angeregt (3). Als Stammlösung verwendet man üblicherweise eine wässrige Lösung mit einer Konzentration von 10 mg/ml und eine Endkonzentration von 0,2 - 0,5 μg/ml (5). Üblicherweise wird die Färbung nach dem Elektrophoreselauf durchgeführt oder im Fall der Agarose Ethidiumbromid auch direkt vor dem Gießen des Geles der Gellösung zugesetzt. Dies ist insofern praktisch, da das Gel während des Laufes immer wieder unter UV-Licht kontrolliert werden kann und die Wartezeit während der nachträglichen Färbung entfällt. Allerdings muss berücksichtigt werden, dass die 'Vorfärbung' auch zu Artefakten führen kann (4). In einer weiteren Anwendung kann DNA sehr sensitive mit Ethidiumbromid quantifiziert werden. Bei einer Anregung mit UV-Licht 250 nm und einer Emission von 605 nm liegt die Empfindlichkeit besser als beim Farbstoff Hoechst 33258. Bei einer Konzentration von 0,5 μg/ml EtBr ist ein Detektionslimit von 10 ng/ml DNA im lineraren Bereich von 20 bis 1250 ng/ml möglich (6). Die Stammlösung sollte bei +4°C dunkel aufbewahrt werden. Achtung: Als DNA-Interkalator ist Ethidiumbromid ein sehr starkes Carcinogen. Die LD50 oral liegt bei der Maus bei 1500 mg/kg, die LD50 subcutan bei 110 mg/kg und die LD50 intraperitoneale Injektion bei 150 mg/kg. Ethidiumbromid wird über den Urin in unveränderter Form ausgeschieden (1). |
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