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| Spezifikation | ||||
|---|---|---|---|---|
| Synonym | N-(trans-Epoxysuccinyl)-L-leucin-4-guanidinobutylamid, trans-Epoxysuccinyl-L-leucylamido-(4-guanidino)butan | |||
| Formel | C15H27N5O5 | |||
| M | 357,40 g/mol | |||
| CAS-Nr. | 66701-25-5 | |||
| HS-Nr. | 29251995 | |||
| Lagerung | -20°C | |||
| Spezifikation | ||||
| Gehalt (DC) | min. 99 % | |||
| α20°C/D; 1 %, 0,1 M HCl | +23° - +26° | |||
| Löslichkeit (2 %; H2O) | klar, farblos | |||
| Literatur |
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(1) Barrett, A.J. et al. (1981) Acta biol. med. germ. 40, 1513-1517 E-64 und verwandte Epoxide als Inhibitoren von Cystein-Proteasen. (2) Barrett, A.J. et al. (1982) Biochem. J. 201, 189-198 E-64 und seine Analoga als Inhibitoren von Cystein-Proteasen. (3) Sarin, A. et al. (1993) J. Exp. Med. 178, 1693-1700 Protease-Inhibitoren hemmen den durch den T-Zellrezeptor ausgelösten programmierten Zelltod. (4) Sarin, A. et al. (1994) J. Immunol. 153, 862-872 Hemmung des programmierten Zelltodes von aktivierten peripheren Blutlymphocyten in HIV+-Donoren. (5) Hom, L.G. & Volkman, L.E. (1998) BioTechniques 25, 18-20 Verhinderung von proteolytischen Artefakten im Baculovirus-Expressionssystem. |
| Hinweis |
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E-64 ist ein irreversibler Inhibitor verschiedener Cystein-Proteasen (Papain, Bromelain, Ficin, Cathepsin B, H und L, Tumor-Cathepsin, Calpain, V-CATH aus Autographa californica M nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) und Streptococcus-Protease). Alle Enzyme werden durch eine Konzentration von 10-30 μM innerhalb von 30 Minuten voll- ständig inhibiert (1, 5). E-64 ist stabil gegen reduzierende Agentien. Stammlösungen werden in Konzentrationen zwischen 1 - 10 mM in DMSO hergestellt und sind für einige Tage bei +4°C stabil (2). Alternativ kann die Stammlösung auch in 50 % Ethanol hergestellt werden. Aliquots können bei -20°C für ca. 1 Monat gelagert werden. E-64 und andere Protease-Inhibitoren (z. B. Diisopropylfluorphosphat und PMSF) sind in der Lage den programmierten Zelltod, der durch Aktivierung des T-Zellrezeptors bei verschiedenen Zelllinen des Immunsystems ausgelöst wird, zu hemmen. Dabei wird nicht die Signaltransduktion blockiert. Die Effekte von Dexamethason, das antago- nistisch zum T-Zellrezeptor den programmierten Zelltod auslöst, werden sogar verstärkt (3, 4). Bei der Expression von Proteinen im Baculovirus-System mit einem funktionellen v-cath-Gen, wird häufig eine proteolytische Aktivität beobachtet, die die Qualität der expremierten Proteine stark beeinträchtigt. Durch Zugabe von E-64 in allen Reaktionsschritten kann dies weitgehend verhindert werden (5). |
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