AppliCations Nr. 11 pBARN Cloning Vectors - Positive Selection of Recombinants

Die BARN-1 und BARN-2 PCR Blunt Klonierungssysteme basieren auf der Ausschaltung der Barnase-Genexpression durch die Insertion eines PCR-Fragmentes in die multiple Klonierungstelle (multiple cloning site, MCS) der pBARN-Vektoren. Barnase ist eine RNase und toxisch für Bakterien. E.coli Zellen, die den nicht-rekombinanten Vektor aufnehmen, werden direkt nach Expression der Barnase getötet. Dadurch wird die klassische blau/weiß-Selektion überflüssig. Im Gegensatz zu anderen positiven Klonierungssystemen sind die BARN-1/-2 - Systeme nicht auf spezielle E.coli-Stämme beschränkt oder auf spezielle Restriktionschnittstellen für die Ligation des Inserts (blunt Klonierung). Die pBARN-Klonierungsvektoren kombinieren die Vorteile der positiven Klonierungssysteme ohne die bekannten Nachteile der anderen verfügbaren Systeme zu haben.

 

 

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